Le jeu propose de combattre des super-vilains comme Venom, Kraven le Chasseur et le Lézard, d'explorer un New York plus vaste (incluant Brooklyn et le Queens), et de s'adapter à de nouveaux pouvoirs, notamment le symbiote pour Peter et les pouvoirs bioélectriques évolués de Miles. Le jeu met également en avant les fonctionnalités de la PS5, comme le retour haptique et les gâchettes adaptatives, ainsi qu'une refonte de l'accessibilité.